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在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，二抗的選擇至關(guān)重要。其中，HRP酶標(biāo)二抗和熒光二抗是兩種常見(jiàn)的二抗類(lèi)型，它們各具特色，并在不同的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景下發(fā)揮著關(guān)鍵作用。一、HRP酶標(biāo)二抗1.定義及特性HRP酶標(biāo)二抗，即辣根過(guò)氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)標(biāo)記的二抗，是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常規(guī)用的二抗。其特點(diǎn)包括比活性高、穩(wěn)定性好、分子量小、純酶容易制備等，因此在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。2.應(yīng)用場(chǎng)景HRP酶標(biāo)二抗常用于如免疫印跡(WB)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)以及免疫組織化學(xué)(I...

細(xì)胞是生命的基本單位，是生物學(xué)研究中非常有用的工具。細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程就是人工模擬細(xì)胞體內(nèi)生長(zhǎng)環(huán)境，置于無(wú)菌、適宜溫度及酸堿度的環(huán)境中，保證充足的營(yíng)養(yǎng)使其不斷生長(zhǎng)繁殖，并維持其結(jié)構(gòu)和功能。作為基礎(chǔ)又常規(guī)的實(shí)驗(yàn)技能，自然頗受關(guān)注。后續(xù)會(huì)創(chuàng)建《常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)攻略》系列，會(huì)為大家介紹一些常見(jiàn)細(xì)胞的培養(yǎng)方案，包括但不限于T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、干細(xì)胞培養(yǎng)等。今天主要是細(xì)胞培養(yǎng)入門(mén)指南的相關(guān)內(nèi)容，其他的內(nèi)容大家可以持續(xù)關(guān)注追更。1.細(xì)胞類(lèi)型1)原代細(xì)胞(primarycell)：...

在當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)技術(shù)正變得越來(lái)越重要。這項(xiàng)技術(shù)能夠在單一組織切片上同時(shí)檢測(cè)多種蛋白質(zhì)，為我們提供了一個(gè)強(qiáng)大的工具，以揭示細(xì)胞和組織內(nèi)部復(fù)雜的生物學(xué)信息。隨著多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)的不斷發(fā)展，越來(lái)越多老師希望在自己的片子上看到更豐富的靶標(biāo)信息，意味著我們需要用到更多種熒光染料去完成染色，但由于熒光染料產(chǎn)生的信號(hào)不是單純的線性，而是呈現(xiàn)山峰狀的分布，在最高點(diǎn)信號(hào)固然最好，但在最高點(diǎn)左右的一段范圍內(nèi)都能夠捕獲到它的信號(hào)，那么相鄰的染料之間，難免會(huì)有...

流程類(lèi)器官原代培養(yǎng)流程準(zhǔn)備工作1、儀器設(shè)備CO2培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、臺(tái)式冷凍離心機(jī)、水浴鍋(abs72023)或水浴搖床，醫(yī)用冰箱、-80℃冰箱、移液器（一套）、眼科剪刀、眼科鑷。2、試劑耗材貨號(hào)品名規(guī)格儲(chǔ)存條件abs9932人正常皮膚類(lèi)器官培養(yǎng)基100mL2-8℃，3個(gè)月abs9931類(lèi)器官人正常皮膚原代組織消化液10mL-20℃，避免反復(fù)凍融，6個(gè)月；2-8℃,避光保存，6個(gè)月abs9751PBS-BSA潤(rùn)洗液100mL-20℃，有效期12個(gè)月abs973...

HEK293細(xì)胞系家族歷史概覽1973年科學(xué)家從一個(gè)父母譜系不祥的人類(lèi)流產(chǎn)胚胎的腎臟中分離出最原始的人胚腎細(xì)胞，即293細(xì)胞（humanembryonickidney(HEK)293cellline），該細(xì)胞被轉(zhuǎn)入修改后的5型腺病毒DNA片段，一開(kāi)始轉(zhuǎn)化非常困難，一直到幾個(gè)月后，科學(xué)家得到一個(gè)穩(wěn)定的可以快速生長(zhǎng)的293單克隆細(xì)胞株，自此HEK293誕生。HEK293細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)和生物技術(shù)中的應(yīng)用頻率僅次于第一個(gè)人類(lèi)細(xì)胞系HeLa，并衍生出數(shù)百種克隆細(xì)胞系。SV40larg...

細(xì)胞消化液是細(xì)胞培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵工具，其原理主要通過(guò)酶解作用破壞細(xì)胞間的連接，使細(xì)胞從組織或培養(yǎng)基質(zhì)上分離成單個(gè)細(xì)胞，以便進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。常用的細(xì)胞消化液包括胰蛋白酶、EDTA和膠原酶等，它們能夠特異性地水解細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)，包括細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、纖維連接蛋白等，從而改變細(xì)胞間的連接狀態(tài)。配方方面，細(xì)胞消化液的配制需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求精確稱取適量的酶粉，并加入適當(dāng)?shù)木彌_液（如D-Hanks液）中，調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍（通常為7.2-7.4），以確保酶的最佳活性。同時(shí)，還需注意...

概述免疫細(xì)胞培養(yǎng)的六個(gè)基本流程：樣本制備、細(xì)胞分選、分型鑒定、擴(kuò)增&培養(yǎng)、質(zhì)量?jī)?yōu)化、后續(xù)研究。小愛(ài)已經(jīng)給大家詳細(xì)介紹了《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之樣本制備（一）》和《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之細(xì)胞分選（二）》，《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之分型鑒定（三）》今天我們繼續(xù)一起學(xué)習(xí)擴(kuò)增&培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。從樣本制備到細(xì)胞分選、分型鑒定，我們終于獲得了純度高、活性好的目的細(xì)胞之后，便需要在體外人工模擬其在體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境，同時(shí)保證無(wú)菌、適宜的溫度和pH，給予免疫細(xì)胞充足的營(yíng)養(yǎng)使其不斷生長(zhǎng)繁殖，這個(gè)過(guò)程便是擴(kuò)增&培...

在生物醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中，細(xì)胞活性檢測(cè)扮演著至關(guān)重要的角色。它不僅幫助科學(xué)家們?cè)u(píng)估細(xì)胞的生存狀態(tài)，還能深入了解細(xì)胞對(duì)藥物、環(huán)境變化或病理過(guò)程的響應(yīng)。細(xì)胞活性檢測(cè)通常包括測(cè)量細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和細(xì)胞死亡等方面。今天，小愛(ài)向大家介紹細(xì)胞活性檢測(cè)的六大常用方法：ATP生物發(fā)光法、LDH檢測(cè)法、MTT比色法、CCK-8法、熒光染料法和細(xì)胞凋亡檢測(cè)法，一起揭秘細(xì)胞活力的科學(xué)奧秘。1、ATP生物發(fā)光法細(xì)胞內(nèi)ATP（腺苷三磷酸）的含量是細(xì)胞能量代謝的直接指標(biāo)。ATP生物發(fā)光法通過(guò)測(cè)量細(xì)胞...