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新型蛋白酶K（ProteinaseK）的基因序列來(lái)源于林伯氏白色念球菌（Tritirachiumalbumlimber）的蛋白酶K基因，經(jīng)過(guò)了基因定點(diǎn)突變和酵母細(xì)胞分泌表達(dá)、色譜純化。經(jīng)過(guò)蛋白質(zhì)工程化的新型蛋白酶K提高了比活性和純度，不含有細(xì)菌內(nèi)毒素，應(yīng)用范圍比天然蛋白酶K更廣泛。新型蛋白酶K是現(xiàn)有蛋白酶中活性zui高的品種，在pH4到pH12的條件下均有活性，反應(yīng)溫度介于0～75oC之間。在常用濃度的SDS、尿素或EDTA存在時(shí)亦很穩(wěn)定。酶切割位點(diǎn)在脂肪族氨基酸和芳香族氨基...

二抗的定義？第二抗體是指能和抗體結(jié)合，即抗體的抗體，其主要作用是檢測(cè)抗體的存在，放大一抗的信號(hào)。二抗是利用抗體是大分子的蛋白質(zhì)具有抗原性的性質(zhì)，去免疫異種動(dòng)物，由異種動(dòng)物的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的針對(duì)于此抗體的免疫球蛋白。二抗針對(duì)某一特定物種（如小鼠）的所有抗體（如IgG、IgM或IgA等）均具有反應(yīng)性。二抗與一抗的區(qū)別？*抗體就是平常所說(shuō)的抗體，即能和抗原特異性結(jié)合。第二抗體是能和抗體結(jié)合的，即抗體的抗體。主要用于檢測(cè)抗體的存在。一抗是針對(duì)抗原的抗體，二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可...

WesternBlot（WB）即蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)。是將蛋白樣本通過(guò)聚丙烯酰胺電泳按分子量大小分離，再轉(zhuǎn)移到雜交膜（blot）上，然后通過(guò)一抗/二抗復(fù)合物對(duì)靶蛋白進(jìn)行特異性檢測(cè)的方法。WB是進(jìn)行蛋白質(zhì)分析zui流行和成熟的技術(shù)之一。本篇討論WesternBlot實(shí)驗(yàn)中關(guān)于蛋白marker的常見(jiàn)問(wèn)題分析，有助于成功完成WB。1.蛋白marker為什么跑的條帶不清楚？答：首先確認(rèn)膠的濃度、PH值，離子強(qiáng)度是不是正常，這些都會(huì)影響條帶的質(zhì)量。其次確定電泳液的PH、離子強(qiáng)度是否正確，如...

AnnexinV-FITC＆PI凋亡檢測(cè)試劑盒●凋亡簡(jiǎn)介細(xì)胞死亡有兩種不同的方式：凋亡和壞死。在正常組織中，不需要的細(xì)胞可以發(fā)生主動(dòng)而自發(fā)的死亡，這種細(xì)胞的程序性死亡也被稱(chēng)為細(xì)胞凋亡。與壞死不同，細(xì)胞凋亡不伴炎癥反應(yīng)，細(xì)胞被快速清除而不影響組織的整體功能，是真核細(xì)胞死亡zui常見(jiàn)的形式。兩者可根據(jù)死亡細(xì)胞的形態(tài)、生物化學(xué)改變等的不同而加以鑒別。細(xì)胞凋亡在調(diào)控細(xì)胞數(shù)量上發(fā)揮與增值相反的作用，和分化、增值協(xié)調(diào)作用，保持機(jī)體正常生存和動(dòng)態(tài)平衡*的兩個(gè)方面。正常的細(xì)胞凋亡在許多生理過(guò)...

牛血清白蛋白（BSA）在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA,通過(guò)提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，減輕不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學(xué)因素引起的變性的。具體的WB實(shí)驗(yàn)操作和BSA在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用愛(ài)必信分享如下：一．蛋白質(zhì)的樣品制備：取心肌組織50mg，待組織塊自行溶解，用濾紙吸去其表面水分，將組織塊放入玻璃勻漿器球狀部位，用組織剪盡量將其剪碎，將剪碎的心肌組織放入玻璃勻漿器的桿狀部，按1mlRIPA+10u...

浩瀚海洋占地球表面積71.8%，占地球總體積的90%以上，在這個(gè)具有巨大時(shí)空尺度的開(kāi)放型復(fù)雜體系中蘊(yùn)藏著種類(lèi)繁多，數(shù)量龐大的海洋生物，據(jù)估計(jì)生物總種類(lèi)達(dá)30多門(mén)50余萬(wàn)種，生物總量占地球總生物量的87%，但與陸生植物相比，人們對(duì)海洋生物的認(rèn)識(shí)和利用率還相當(dāng)有限。海洋是大自然賦予天然產(chǎn)物化學(xué)家進(jìn)行藥物研究的廣闊領(lǐng)域，三十余年來(lái)各國(guó)科學(xué)家對(duì)海洋生物進(jìn)行了廣泛的研究,從中分離和鑒定出了15000余種海洋天然活性物質(zhì)，并且每年以600-800個(gè)新天然產(chǎn)物的速度增加。海洋生物的特殊生活...