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活性氧（ROS）是細胞代謝的副產物，包括超氧陰離子自由基、過氧化氫、羥基自由基等。它們在細胞信號傳導中起作用，但過量產生會導致細胞損傷，并與多種疾病有關。目前針對ROS的檢測方法包括熒光染色法、化學發(fā)光法、電子順磁共振技術（EPR/ESR）、電化學生物傳感器、色譜法、分光光度法和基于熒光蛋白的方法（表1）。表1常用ROS的檢測方法ROS檢測方法方法描述熒光染色法使用特定的熒光探針如DCFH-DA，可以檢測多種ROS，探針本身無熒光，進入細胞后被酯酶水解生成DCFH，隨后被RO...

什么是膜蛋白？膜蛋白是細胞膜的重要組成部分，負責許多關鍵的生物學功能如物質運輸、信號轉導和細胞間識別等，人類基因組中編碼的膜蛋白約占總蛋白質組的25%左右。它們可以根據(jù)其與膜的結合方式和功能特點被分為不同的類別。以下是膜蛋白的一些主要類型和功能：1、膜蛋白分類外在膜蛋白：這些蛋白分布在細胞膜的內外表面，約占膜蛋白的20%-30%，主要在內表面。它們通過離子鍵、氫鍵與膜脂分子的極性頭部相結合，或通過與內在蛋白的相互作用，間接與膜結合，大多是親水性蛋白，主要的類型有酶類、受體蛋白...

在當今生物醫(yī)學研究領域，精準、高效地識別和追蹤目標分子是解鎖疾病機制、開發(fā)新型藥物以及推動個性化醫(yī)療的關鍵?？贵w/蛋白標記技術作為一種強大的工具，在這一過程中發(fā)揮著不可替代的作用。通過將特定的化學標簽（如熒光染料、酶或放射性同位素）與抗體或蛋白質共價結合，研究人員能夠以更高的靈敏度和特異性對復雜生物系統(tǒng)中的目標分子進行可視化和定量分析。常見抗體/蛋白標記技術熒光素標記：使用熒光素如AlexaFluor系列（AF488\AF594\AF647等）、Cy系列（Cy3\Cy5\Cy...

小伙伴們在上篇學習了ELISA實驗的原理、類型，并且根據(jù)自己的需求選擇了適合自己的試劑盒，那接下來就是ELISA的實操了，包括哪些實驗步驟和注意事項呢？快來和小愛一探究竟吧！ELISA實驗步驟圖1ELISA標準實驗流程1、樣本采集：a）血漿：采集血漿時可使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝血劑。采集后30min內，1000xg離心15min。立即檢測或分裝后于≤-20℃儲存。避免反復凍融。b）細胞培養(yǎng)上清液：通過離心去除顆粒，立即檢測或分裝后將樣品于≤-20°C儲存。避免反復...

作為常見實驗技能之一的ELISA已經成功逼瘋了一大批研究生：加樣加到手抽筋，拍板拍到人發(fā)瘋。為此，小愛嘔心瀝血寫了一份ELISA實驗詳解，原理、步驟、注意事項一網(wǎng)打盡，幫助各位小伙伴快速入門并精通ELISA（分為上下兩篇噢）。ELISA實驗原理酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay，簡稱ELISA)，是一種利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法，是免疫學經典實驗方法。ELISA可適用多種樣本類型，主要包括血清、血漿、細...

提到細胞凋亡，想必大家都不陌生，咱們這個領域的，先不說本科的時候學過，考研的時候怎么說它也是重要考點之一?；蛟S此時您的腦袋瓜子里立馬浮現(xiàn)出課本上那個經典的凋亡信號通路圖......額，還有點記不清......沒關系，今天小編帶您回顧一下經典的細胞凋亡信號通路，再看看它常見的檢測方法?！罴毎蛲?）細胞凋亡是一種細胞主動有序的死亡，它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等作用，它并不是病理條件下自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為了更好地適應生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡。2）細胞凋亡相關信...

什么是TR-FRET？TR-FRET（Time-ResolvedFluorescenceResonanceEnergyTransfer，時間分辨熒光共振能量轉移）是一種用于研究分子間相互作用的生物物理技術。它結合了兩種技術：熒光共振能量轉移(FRET)和時間分辨熒光(TRF，Time-ResolvedFluorescence)。熒光共振能量轉移原理圖熒光共振能量轉移(FRET)是一種物理現(xiàn)象，其中一個熒光分子（供體）在吸收光能后，可以將激發(fā)能量非放射性地傳遞給另一個分子（受體...

它們的概念分別是什么？PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR這四種技術都是基于聚合酶鏈式反應（PCR）的技術，但是它們之間存在一些區(qū)別。PCR：聚合酶鏈式反應（PCR）是一種體外擴增DNA分子的技術，利用DNA聚合酶和多個引物在所需溫度下擴增目標DNA分子。PCR反應分為三個階段：預變性、變性-退火-延伸和延伸。PCR技術主要用于DNA序列的擴增和檢測，應用廣泛，如基因克隆、DNA序列測定等。qPCR：實時定量聚合酶鏈式反應（qPCR）是一種實時檢測PCR過程中熒光信...