在多重熒光免疫組化(mIHC)實驗中,選擇正確的一抗至關重要,但實驗中一些常被忽視的小步驟,如抗體稀釋液的選擇,實際上對實驗成敗起著決定性作用。本文將探討如何通過選擇合適的抗體稀釋液來優(yōu)化mIHC結果??贵w稀釋液的重要性抗體稀釋液不僅影響抗體與靶標的特異性相互作用,還影響抗體的穩(wěn)定性。常用的稀釋液包括PBST、TBST、PBS和TBS等。了解它們的區(qū)別對于精準選擇至關重要。緩沖液成分對比緩沖液組成成分PBSTNa2HPO4,KH2PO4,NaCl,KCl,Tween-20PB...
1、什么是內參?內參是WesternBlot實驗中用于標準化和校正實驗誤差的一類蛋白質。它們通常是在不同組織和細胞中表達相對恒定的蛋白質,由管家基因編碼,常用作檢測目的蛋白表達水平變化時的參照物。2、內參在WB中的作用是什么?校正實驗誤差:內參用于校正蛋白質定量和上樣過程中的實驗誤差,以保證實驗結果的準確性。由于不同的樣品在蛋白質提取、定量、上樣等步驟中可能存在操作誤差,使用內參可以對這些誤差進行校正。半定量分析:通過比較內參和目標蛋白的信號強度,可以對實驗結果進行半定量分析...
概述免疫細胞培養(yǎng)的六個基本流程:樣本制備、細胞分選、分型鑒定、擴增&培養(yǎng)、質量優(yōu)化、后續(xù)研究。小愛已經給大家詳細介紹了《免疫細胞培養(yǎng)攻略之樣本制備(一)》、《免疫細胞培養(yǎng)攻略之細胞分選(二)》、《免疫細胞培養(yǎng)攻略之分型鑒定(三)》、《免疫細胞培養(yǎng)攻略之擴增&培養(yǎng)(四)》、《免疫細胞培養(yǎng)攻略之質量優(yōu)化(五)》今天我們繼續(xù)來了解一下后續(xù)研究。后續(xù)研究(Follow-UpStudy):運用流式細胞術、ELISA、細胞共培養(yǎng)等實驗技術研究免疫細胞的功能(殺傷能力、分泌細胞因子、吞噬功...
外泌體提取試劑盒是一種用于從生物樣本中快速、高效地提取外泌體的工具。其原理主要基于外泌體的生物學特性以及膜蛋白和外泌體特異性標記物的相互作用。試劑盒中的特殊高親和力材料,如磁珠或硅膠,具有特異性結合外泌體膜蛋白的能力。當樣本與這些材料接觸時,外泌體膜蛋白會與材料結合形成復合物。通過磁力或離心的方式,可以將這些復合物從樣本中分離出來。磁力分離時,磁珠上的外泌體膜蛋白結合復合物會被磁力吸附,隨后用磁力將磁珠與其他非目標物質分離。而在離心分離中,復合物會在高速離心作用下沉降,與上清...
病理檢查一直被譽為疾病診斷的“金標準”,是認識疾病本質的理論基礎,病理學診斷在醫(yī)學診斷中常被認為是“quan威診斷”,意義重大。但傳統(tǒng)的病理診斷面臨著主觀因素大,缺乏客觀數(shù)據(jù);效率低,耗費大量時間;沒有精準的統(tǒng)計,重復性低等缺陷。為此,科學家們也一直在尋求和創(chuàng)造新的分析技術及方法:數(shù)字病理,全切片影像系統(tǒng),機器學習,人工智能....病理診斷的工作很復雜,但是病理圖像分析的流程卻很簡單:從標準化制片到染色、掃描成全切片數(shù)字圖像、再到最后的圖像分析及管理和共享,前面的三步隨著設備...
精準成像,全面分析,深入探索細胞的微觀世界腫瘤區(qū)域周圍微環(huán)境免疫細胞距離分布實驗原理:在石蠟包埋的甲狀腺癌組織切片上對切片進行TSA酪胺信號方法技術,采用HRP標記的二抗,HRP催化加入體系的熒光素底物,生成活化熒光底物,活化底物可與抗原上的酪氨酸共價結合,使樣品上穩(wěn)定地共價結合熒光素。之后用熱修復洗去非共價結合的抗體,避免交叉反應,如此往復實現(xiàn)多重熒光標記。gao端服務:使用Absin多重TSA染色技術同時標記6-9種生物標志物后,使用TissueFAXSSpectra系統(tǒng)...
T細胞作為免疫系統(tǒng)的衛(wèi)士,肩負著適應性免疫的重擔,在細胞免疫和體液免疫都有著關鍵性的作用。不僅如此,基于T細胞的三大免疫療法:CAR-T、TCRT、TILs也在“遍地開花”。截止目前,F(xiàn)DA共批準了6款CAR-T產品,中國也上市了5款CAR-T產品,全球共有11款CAR-T產品獲批!2024年2月16日,TIL療法-lifileucel(LN-144)獲批上市,用于治療晚期黑色素瘤,成為有望攻克實體瘤的又一把利劍。類器官與T細胞的共培養(yǎng)也是一大研究“爆點”:T細胞與腫瘤類器官...
概述免疫細胞培養(yǎng)的六個基本流程:樣本制備、細胞分選、分型鑒定、擴增&培養(yǎng)、質量優(yōu)化、后續(xù)研究。小愛已經給大家詳細介紹了《免疫細胞培養(yǎng)攻略之樣本制備(一)》、《免疫細胞培養(yǎng)攻略之細胞分選(二)》、《免疫細胞培養(yǎng)攻略之分型鑒定(三)》、《免疫細胞培養(yǎng)攻略之擴增&培養(yǎng)(四)》今天我們繼續(xù)一起學習質量優(yōu)化的相關知識。質量優(yōu)化(QualityOptimization):針對一些不良因素,如樣本制備成單細胞懸液時產生的細胞團塊、碎片等;細胞擴增培養(yǎng)時支原體和內毒素的影響,并積極采取對應的...
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