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問題一：缺乏染色可能的原因檢測(cè)方法和相應(yīng)的措施沒有抗原用原位雜交的方法檢測(cè)蛋白表達(dá)（有時(shí)即使能檢測(cè)到mRNA。翻譯也有可能受阻）由于錯(cuò)誤的儲(chǔ)存方法按照說(shuō)明書儲(chǔ)存。通常，將抗體按照足夠配制單次實(shí)驗(yàn)工作溶液的體積分裝。儲(chǔ)存在手動(dòng)除霜冰箱中（-20到-70℃），避免反復(fù)凍融無(wú)效的一抗或二抗單獨(dú)檢查報(bào)告系統(tǒng)以評(píng)估試劑的有效性。固定不充分嘗試增加固定時(shí)間或改用不同的固定劑過度固定減少浸潤(rùn)或固定后步驟的時(shí)間。如果必須使用浸潤(rùn)法固定（例如病理實(shí)驗(yàn)室中的尸檢組織或切片），可以用抗原修復(fù)試劑修...

都說(shuō)是封閉，羊血清究竟封閉的是什么（抗原？）那接下來(lái)加一抗怎么又能反應(yīng)結(jié)合？不是封閉了嗎？封閉的目的是為了減少非特異染色。這里，允許小編介紹下免疫組化中封閉血清的原理，封閉血清的原理主要有兩點(diǎn)：*是待檢樣本會(huì)非特異性的和蛋白結(jié)合，從而導(dǎo)致背景過高，因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合，從這點(diǎn)看，BSA和血清沒有明顯區(qū)別。第二是待檢樣本中可能會(huì)有Fc受體，可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合，與抗體特異性無(wú)關(guān)，封閉血清中有抗體，因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合。...

問題一：高背景可能的原因解決方法去污劑不溶性蛋白有殘留離心后立即去除上清，沉淀中留有不溶性蛋白質(zhì)，如果再次有懸浮發(fā)生，再次離心洗滌不充分蓋上管蓋離心前反復(fù)顛倒幾次非特異性蛋白質(zhì)與珠子結(jié)合珠子用BSA預(yù)封閉不充分，確保牛血清白蛋白（組分V）新鮮，新鮮珠子與含1%牛血清白蛋白的PBS孵育1小時(shí)，使用前PBS洗3-4次使用的抗體特異性不強(qiáng)使用親和純化的抗體，預(yù)先吸收使用太多抗體導(dǎo)致非特異性結(jié)合檢查推薦抗體用量。嘗試使用更少的抗體細(xì)胞裂解液中含有太多的細(xì)胞或太多蛋白，導(dǎo)致洗脫液中很多...

問題一：轉(zhuǎn)膜不充分可能的原因驗(yàn)證或解決方法膜沒有*均勻濕透使用100%甲醇浸透膜靶蛋白分子量小于10kDa選擇小孔徑的膜，縮短轉(zhuǎn)移時(shí)間靶蛋白等電點(diǎn)等于或接近轉(zhuǎn)移緩沖液PH值可嘗試使用其他緩沖液如CAPS緩沖液（pH10.5）或使用低pH值緩沖液如乙酸緩沖液甲醇濃度過高過高甲醇濃度濃度會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)與SDS分離，從而沉淀在凝膠中，同時(shí)會(huì)使凝膠收縮或變硬，從而抑制高分子量蛋白的轉(zhuǎn)移。降低甲醇濃度或者使用乙醇或異丙醇代替轉(zhuǎn)移時(shí)間不夠?qū)τ诤竦哪z以及高分子量蛋白需要延長(zhǎng)轉(zhuǎn)移時(shí)間問題二：背...

注意事項(xiàng)★一定要使用我們盒內(nèi)配套的電泳緩沖液；★上樣量和濃度不能過高。1.我們的預(yù)制膠與哪些品牌電泳槽兼容？●Bio-RadMini-PROTEAN(II/3/TetraSystem)；●HoeferMightySmall(SE250/SE260/SE280)；●LifeTechnology(Invitrogen)；●NovexMini-Cell；●MiniGelTank(A25977)(請(qǐng)與EZbiolab特制擋板配合使用)；●北京六一DYCZ-25E；●君意東方JY-SC...

WesternBlot（WB）即蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)，是將蛋白樣本通過聚丙烯酰胺電泳按分子量大小講蛋白分離，再通過電場(chǎng)力將蛋白轉(zhuǎn)移到雜交膜上。然后通過一抗/二抗復(fù)合物對(duì)靶蛋白進(jìn)行特異性檢測(cè)的方法。WB是進(jìn)行蛋白質(zhì)分析zui流行和成熟的技術(shù)之一。在WB過程中，分子量Marker就像個(gè)螺絲釘一樣，只是個(gè)小細(xì)節(jié)，然而就是這樣一個(gè)小細(xì)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著不可忽視的作用。這個(gè)WB參照家族的一員的作用主要是用來(lái)指示蛋白條帶所對(duì)應(yīng)的分子量大小，只有標(biāo)準(zhǔn)量無(wú)誤了，實(shí)驗(yàn)結(jié)果才有說(shuō)服力，除此之外，蛋白標(biāo)...

雞胚提取物它的K、Fe、Se礦物元素和維生素A、D、B2等含量也很高。這使得它不但具有補(bǔ)充這些營(yíng)養(yǎng)素的作用，而且，還可能有一些保健功能。本試驗(yàn)用低硒飼料喂飼的小鼠4周后，各劑量組和低硒對(duì)照組動(dòng)物全血GPX活性抑制率30%，試驗(yàn)至8周末，低硒組血硒降低，全血GPX活性抑制率仍30%。說(shuō)明硒營(yíng)養(yǎng)不良動(dòng)物模型建立成功。而且，低硒組動(dòng)物的血硒、GPX活性保持在較低水平，顯示硒營(yíng)養(yǎng)不良動(dòng)物模型穩(wěn)定。小鼠的腦、肝硒含量均降低(P0.05)，腦、腎、肝GPX也顯著性降低(P0.05)，而全...

免疫學(xué)三大工具，IHC、Westernblot、ELISA，分別用于定位，定性和定量!IHC（免疫組化）是融合了免疫學(xué)原理（抗原抗體特異性結(jié)合）和組織學(xué)技術(shù)（組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等），通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色，來(lái)對(duì)組織（細(xì)胞）內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。樣本是細(xì)胞或組織，要在顯微鏡下觀察結(jié)果，可能出現(xiàn)膜陽(yáng)性、質(zhì)陽(yáng)性和核陽(yáng)性。ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）用到了免疫學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色，待測(cè)的樣品...