簡(jiǎn)要描述:EDTA是一種相對(duì)較好的螯合脫鈣劑,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響最小,可以較好的保存組織的某些酶類,經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。
產(chǎn)品分類
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品牌 | absin | CAS | - |
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分子式 | - | 純度 | - |
分子量 | - | 貨號(hào) | abs9223 |
規(guī)格 | 500ml | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | - | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述:
一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時(shí),含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因?yàn)殁}和石蠟之間的密度不同,較難切除完整的切片。對(duì)含鈣組織最好固定之后,再進(jìn)行脫鈣或二者同時(shí)進(jìn)行。然后進(jìn)行下游的實(shí)驗(yàn),如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機(jī)酸、無機(jī)酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。
EDTA是一種相對(duì)較好的螯合脫鈣劑,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響最小,可以較好的保存組織的某些酶類,經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。
使用方法:
1、骨組織脫鈣時(shí),取材不易過厚,一般大約 5mm;
2、組織固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min;
3、組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min;
4、組織轉(zhuǎn)移至 20~30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中,脫鈣 10~30 天或更長(zhǎng)時(shí)間。如果想加快脫鈣速度,可以置于 37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,多數(shù)組織脫鈣 2 周~3 個(gè)月即可,每周更換一次,直至終點(diǎn);
5、用蒸餾水沖洗數(shù)次;
6、常規(guī)脫水、包埋。
注意事項(xiàng):
1、厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時(shí)間一般脫鈣 10~30 天即可。
2、適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過 37~40℃,溫度過高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于 60℃。
3、防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時(shí)盡量縮短脫鈣時(shí)間,以免脫鈣過長(zhǎng)引起組織損害。
4、脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5、骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時(shí)進(jìn)行,不應(yīng)先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。
6、每隔一段時(shí)間檢測(cè)一次脫鈣程度,避免脫鈣過度,脫鈣過度會(huì)增加組織的損傷程度,影響染色結(jié)果。
7、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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