簡(jiǎn)要描述:纖維蛋白酶(Thrombin)來(lái)源于牛血漿,分子量37KD,是由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過(guò)二硫鍵組成的。纖維蛋白酶是蛋白質(zhì)水解酶,其催化纖維蛋白原(Fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纖維蛋白單體,單體進(jìn)一步聚合,在血小板、紅細(xì)胞和白細(xì)胞等參與下形成血凝塊。
產(chǎn)品分類(lèi)
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品牌 | absin | 貨號(hào) | abs47047374 |
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規(guī)格 | 1000U | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 僅限科研使用 |
產(chǎn)品描述:
纖維蛋白酶(Thrombin)來(lái)源于牛血漿,分子量37KD,是由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過(guò)二硫鍵組成的。Thrombin是蛋白質(zhì)水解酶,其催化纖維蛋白原(Fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纖維蛋白單體,單體進(jìn)一步聚合,在血小板、紅細(xì)胞和白細(xì)胞等參與下形成血凝塊。
6、性?xún)r(jià)比及其突出,尤其對(duì)于工業(yè)客戶(hù),國(guó)內(nèi)產(chǎn)品的價(jià)格,國(guó)際頂尖產(chǎn)品質(zhì)量。
來(lái)源:牛血漿
純度:2000U/mg
使用方法:
(一)融合蛋白切割由于Thrombin具有切割序列專(zhuān)一性強(qiáng),水解效率高的特點(diǎn),它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開(kāi)發(fā),其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。 Thrombin是一種廣泛用于切割標(biāo)簽的蛋白酶,能夠有效切質(zhì)量比僅為1:2000的蛋白。切割可在20℃到37℃之間切割0.3到16小時(shí)。Thrombin最佳的切割位點(diǎn)是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',這里X4 和 X3 是疏水氨基酸而X1'和 X2'是非酸性氨基酸,一些經(jīng)常使用的識(shí)別位點(diǎn)是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和MY-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之間切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他識(shí)別位點(diǎn)是 X2-R[K]-X1', 例如A-R-G和G-K-A,這里切割發(fā)生在第二個(gè)殘基后。有效的消化緩沖液是20mM Tris-HCl緩沖液,含150mM氯化鈉,pH8.0。Thrombin可從切割產(chǎn)物中用p-氨基瓊脂糖親和純化,或者苯甲脒瓊脂糖移去。
(二)血小板聚集試驗(yàn) Thrombin與血小板表面的Thrombin受體結(jié)合,活化血小板,使血小板粘附和聚集。 血小板聚集實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn):兔血用塑料管收集和用ACD(86 mmol/L檸檬酸鈉,111 mmol/L葡萄糖,53 mmol/L檸檬酸)0.15體積比抗凝,200 g離心10 min,離心2次,取上清,800g離心15 min。沉淀中加Tyrode—Hepes緩沖液(140 mmol/L NaCl,5 mmol/L KCl,1 mmol/L MgCl2,10 mmol/L Hepes,10mmol/L葡萄糖,pH 7.4)調(diào)節(jié)至血小板數(shù)為(3~4)×1011/L。血小板聚集用血液凝集儀來(lái)測(cè)定。血小板懸液(0.2ml )與藥物溫育1 min,然后用Thrombin(500 u/L)作用5 min,記錄聚集情況。
技術(shù)指標(biāo):
儲(chǔ)備溶液可在0.1%(w/v)BSA溶液中以100單位/ml的濃度制備。儲(chǔ)備溶液在0–5°C下保持活性一周。由于Thrombin溶液吸附到玻璃上,因此建議將溶液等份放入塑料管中,并在-20°C下儲(chǔ)存,以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
BSA使用水或PBS配置溶液
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