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Western一抗二抗去除液(弱堿性)

簡(jiǎn)要描述：Western一抗二抗去除液(弱堿性)使用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體時(shí)，封閉液必須使用5%脫脂奶粉配制。使用堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體時(shí)，封閉液必須使用酪蛋白(casein)配制。

  • 產(chǎn)品型號(hào)：abs968
  • 廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間：2024-07-09
  • 訪  問(wèn)  量：1777

詳細(xì)介紹

品牌absin貨號(hào)abs968
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)
產(chǎn)品描述
描述

    Western一抗二抗去除液又稱膜再生液或Western抗體洗脫液(Stripping buffer)，用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后，有時(shí)還需要檢測(cè)GAPDH、β-actin等表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定的管家蛋白或其它蛋白作為參照。Stripping buffer可以洗脫一抗二抗，非常方便地重新利用使用過(guò)的膜，檢測(cè)其它蛋白。 Stripping buffer多次重復(fù)使用同一張膜，會(huì)導(dǎo)致蛋白信號(hào)的減弱不宜重復(fù)利用膜，一般可以利用2～3次。

    通過(guò)使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用過(guò)的膜檢測(cè)其它蛋白。和重新跑一個(gè) SDS-PAGE 膠相比，不僅省時(shí)省力，而且可以消除重新上樣而帶來(lái)的誤差，使可比性更強(qiáng)。

    主要依靠堿性來(lái)解除一抗二抗的結(jié)合，同時(shí)又不會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失， 適用于Western化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后的蛋白膜的重復(fù)利用，尤其適用于PVDF膜，其次為硝酸纖維素膜。非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)(如DAB，NBT/BCIP)不適用于本試劑。

注意事項(xiàng)：
1、使用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體時(shí)，封閉液必須使用5%脫脂奶粉配制。使用堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體時(shí)，封閉液必須使用酪蛋白(casein)配制。
2、特別適用于PVDF膜的再生，硝酸纖維素膜的再生效果不如PVDF膜。
3、適用于ECL等類似的化學(xué)發(fā)光液的檢測(cè)后的一抗二抗洗脫。非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)(如DAB，NBT/BCIP)不適用于本試劑。
4、有輕微腐蝕性，使用時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)。
5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1、在膜完成Western化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后，蒸餾水中漂洗5min。 2、棄蒸餾水，加入Western一抗二抗去除液（弱堿性），*覆蓋住膜。 3、搖床上漂洗20-30min。 4、棄液，盡量把Western一抗二抗去除液（弱堿性）去除干凈，必要情況下，可以用濾紙吸干。 5、加入蒸餾水振蕩漂洗2～3次，每次漂洗3～5min。 6、入封閉液進(jìn)行封閉后(推薦酪氨酸或脫脂奶粉作為封閉液)，進(jìn)行Western后續(xù)操作。
基本信息
PH值
pH=10.0
儲(chǔ)存/保存方法
4℃保存，有效期12個(gè)月。
溫馨提示：本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用，不支持臨床等研究

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