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細(xì)胞培養(yǎng)常用抗生素大全

更新時間:2023-07-05      點擊次數(shù):1147

抗生素(Antibiotics)是由微生物(包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬)或高等動植物在生活過程中所產(chǎn)生的,具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產(chǎn)物或人工合成的類似物,能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。在篩選穩(wěn)定表達(dá)株、抑制微生物或腫瘤細(xì)胞、調(diào)節(jié)細(xì)胞等方面發(fā)揮重要作用。

 

抗生素在細(xì)胞培養(yǎng)中的使用可以最大限度地降低由于污染導(dǎo)致的寶貴細(xì)胞、昂貴試劑以及較多時間的損失。經(jīng)驗豐富的研究人員建議在培養(yǎng)細(xì)胞時使用足夠濃度的經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)測試的抗生素。例如青霉素-鏈霉素是青霉素和鏈霉素的混合物,廣泛用于哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基中,用以防止細(xì)菌污染。某些抗生素,如遺傳霉素、潮霉素、殺稻瘟菌素、嘌呤霉素等,也用作選擇劑,用于選擇和建立轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞。

 

G-418溶液(遺傳霉素)   abs44062790

G-418(Geneticin,遺傳霉素)是一種氨基糖苷類抗生素,在分子遺傳實驗中,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染常用的抗性篩選試劑。G-418可以干擾80S核糖體的功能,并影響真核細(xì)胞中蛋白質(zhì)的合成,主要用于哺乳動物、植物或酵母細(xì)胞的選擇。G-418對細(xì)菌、酵母、高等植物、哺乳動物細(xì)胞、原蟲和蠕蟲均有毒性,其抗性基因為顯性表型,在Tn601(903)和Tn5轉(zhuǎn)座子上都有定位。G-418溶液經(jīng)過濾除菌,一般工作濃度為50~1000ug/ml不等,不同類型的細(xì)胞需要根據(jù)實驗確定最佳濃度。

一般來說,剛開始篩選轉(zhuǎn)化子需要高濃度的G418,并用一個較低濃度的G418用于維持培養(yǎng)。生長條件,細(xì)胞類型和其他的環(huán)境因素都可能影響G418的用量,因此第一次使用的實驗體系建議通過殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。通常情況,哺乳動物細(xì)胞篩選范圍200-2000μg/mL;植物細(xì)胞:10-100μg/mL;酵母細(xì)胞:500-1000μg/mL;網(wǎng)柄菌屬:10-100μg/mL。

潮霉素B    abs47014828

潮霉素B(Hygromycin B),從吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus)分離到的一種氨基糖苷類抗生素。通過與30S核糖體亞基結(jié)合,誘導(dǎo)對mRNA模板的錯讀且抑制易位,從而以阻止蛋白合成。潮霉素B能殺死細(xì)菌、真菌和高等真核細(xì)胞。主要用來篩選和維持培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 Hph 載體的原核細(xì)胞或真核細(xì)胞(植物細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞)。

潮霉素B用來篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細(xì)胞代謝率而變化。

? 哺乳動物細(xì)胞使用濃度:50-1000μg/mL,常用篩選濃度為200μg/mL,最佳濃度需要殺滅曲線來確定;
? 植物細(xì)胞常用濃度:20-200μg/mL;
? 細(xì)菌常用濃度:20-200μg/mL;
? 真菌常用濃度:200-1000μg/mL。

殺稻瘟菌素S(滅瘟素)溶液   abs47014830

殺稻瘟菌素(Blasticidin S),也稱為滅瘟素S鹽酸鹽,稻瘟散,從灰色鏈霉菌Streptomyces griseochromogenes分離到的一種核苷肽類抗生素。主要通過干擾核糖體中肽鍵的形成來特異性抑制原核和真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成。殺稻瘟菌素S用于篩選攜帶bsr或BSD基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素S具有快速而強效的作用模式,一個星期內(nèi)完成陽性克隆的篩選,且很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。Blasticidin S為溶于HEPES buffer,pH 7.5的無菌溶液,濃度為10mg/mL。用于細(xì)菌篩選的常用濃度為25-100μg/mL,用于哺乳動物細(xì)胞篩選的常用濃度為1-50μg/mL,初次實驗建議通過滅殺曲線來確定最佳使用濃度。

鏈脲菌素   abs812888

鏈脲菌素(Streptozocin)是一種廣譜抗生素,具有抗菌、抗腫瘤的性能,能抑制腫瘤細(xì)胞DNA合成,并能抑制嘧啶核苷代謝和糖原異生的某些關(guān)鍵酶。在體內(nèi),鏈脲菌素能自發(fā)分解并產(chǎn)生引起DNA雙鏈交聯(lián)的甲基碳化離子,是一種DNA甲基化的誘導(dǎo)劑。還具有誘發(fā)糖尿病的作用,該藥對動物的胰島β細(xì)胞具有高度選擇性的毒性作用,因其操作簡單、成模快、模型穩(wěn)定性好等優(yōu)點,現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于糖尿病動物模型的構(gòu)建。

 

鹽酸萬古霉素   abs815996

鹽酸萬古霉素(Vancomycin hydrochloride)是一種可在肽聚糖生物合成水平阻斷細(xì)菌細(xì)胞壁生物合成的糖肽抗生素,為窄譜抗生素,僅對革蘭氏陽性菌有效;是通過抑制易感細(xì)菌的細(xì)胞壁合成的第二階段起作用,還可改變細(xì)胞膜的滲透性并選擇性地抑制核糖核酸的合成。

 

渥曼青霉素   abs817875

渥曼青霉素(Wortmannin)無明顯的抗細(xì)菌作用,但具有很強的抑制真菌活性。是一種有效的,不可逆的,選擇性PI3K抑制劑。還可以抑制自噬體的形成,并有效抑制DNA-PK/ATM和Polo-like kinase 1 (PLK1)。Wortmannin通過對PI3K/Akt信號傳導(dǎo)途徑的抑制,能夠提高輻射或者去血清培養(yǎng)誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡效果,也能阻止細(xì)胞因子的抗細(xì)胞凋亡作用。Wortmannin對PI3K的抑制作用也可以阻止由胰島素受體活化引起的許多短期代謝效應(yīng)。

硫酸博萊霉素   abs817895

硫酸博來霉素(Bleomycin Sulfate)是一類水溶性堿性糖肽類抗生素。主要抑制胸腺嘧啶核苷參入DNA,與DNA結(jié)合使之破壞分解,作用于增殖細(xì)胞周期的S期。是具有有效抗腫瘤活性的DNA合成抑制劑???strong>用于抗性篩選和誘導(dǎo)肺纖維化模型。



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