ECL化學發(fā)光檢測試劑盒常見問題
更新時間：2019-10-30 點擊次數：2070
愛必信熱賣單品ECL化學發(fā)光檢測試劑盒，靈敏度更高，背景更低，穩(wěn)定性更好。常備現貨， 小編整理了ECL 的常見問題，助您的實驗更順利！ | 問題 | 原因 | 方法 | | 白色條帶黑色背景 | 體系中HRP過量 | 進一步稀釋HRP 標記 | | 膜上有棕色或黃色條帶 | | 背景發(fā)亮 | | 信號弱或無信號 | HRP過量，消耗底物 | 進一步稀釋HRP 標記 | | 抗原或抗體不足 | 增加抗體 | | 使用超級ECL | | 轉膜失敗 | 優(yōu)化轉膜條件 | | HRP 活性低 | 測試HRP 活性：暗室中，將1ul未稀釋的HRP 放入裝有1-2ml的基質工作
溶液的試管中。 幾分鐘內，溶液會立即發(fā)出藍光。 | | 高背景 | HRP過量，消耗底物 | 進一步稀釋HRP 標記 | | 封閉不充分或使用了不適當的封閉試劑 | 優(yōu)化轉膜條件 | | 洗滌不充分 | 增加洗滌時間和次數 | | 膜過度曝光 | 減少曝光時間 | | 抗原、抗體 過量 | 減少抗體上樣量 | | 抗體特異性差 | 優(yōu)化抗體特異性 | | 條帶有斑點 | 轉膜失敗 | 優(yōu)化轉膜條件 | | x射線膠片與膜之間有氣泡 | 去除所有氣泡后，再曝光到膠片上 | | 背景有斑點 | 形成聚合體 | 使用前通過0.2um過濾器過濾hrp -偶聯物 | | 電泳轉移過程中溫度過高 | 控制電泳和轉移過程中的溫度 | | 非特異性條帶 | HRP-偶聯物過量 | 進一步稀釋hrp -偶聯物 | | SDS導致非特異性蛋白結合 | 在免疫檢測過程中不要使用SDS | | 抗體特異性差 | 優(yōu)化抗體特異性 |
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