講述組化筆的特點(diǎn)及其分類
更新時(shí)間:2018-05-08 點(diǎn)擊次數(shù):2755
組化筆特征,防水,熱穩(wěn)定,使試劑定位于細(xì)胞和組織切片上特定的位置,避免試劑浪費(fèi)。淺藍(lán)色,容易識別,可溶解于二甲苯及二甲苯替代物,方便清除,環(huán)保,不含碳氟化合物和氯碳化合物等破壞臭氧層的物質(zhì)。
組化筆使用方法,先將組織切片脫蠟水化,然后用薄紙抹去在玻片上的組織邊緣的液體,再用免疫組化筆在玻片上被檢體周圍畫圈或在組織邊緣上下各畫一條線,干燥10-15秒,之后將玻片浸在PBS耐熱性能,試驗(yàn)過程中的耐熱性為120攝氏度以下。石蠟組織切片的畫圈,切片脫蠟水化,PBS沖洗,甩干PBS液,在組織片周圍畫圈,油圈距離組織片邊緣2-3mm;在使用實(shí)驗(yàn)用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應(yīng)在室溫下干燥1-2分鐘后再進(jìn)行下一步操作流程。如果需要使用胰蛋白酶或其它蛋白酶消化或者進(jìn)行抗原熱修復(fù)處理切片,應(yīng)待這些步驟完成后再使用實(shí)驗(yàn)用免疫組化筆。
冰凍切片的畫圈,將載玻片清洗干凈,用防脫片劑(如Poly-L-Lysine或APES)防脫處理,切片、貼片,PBS浸洗組織片,甩干PBS液,在組織片周圍畫圈,畫圈距離組織邊緣2-3mm;在使用實(shí)驗(yàn)用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應(yīng)在室溫下干燥1-2分鐘后再進(jìn)行下一步操作流程。如果需要使用胰蛋白酶或其它蛋白酶消化或者進(jìn)行抗原熱修復(fù)處理切片,應(yīng)待這些步驟完成后再使用實(shí)驗(yàn)用免疫組化筆。
細(xì)胞培養(yǎng)皿\培養(yǎng)玻片的畫圈,以PBS清洗培養(yǎng)皿內(nèi)\培養(yǎng)玻片上的細(xì)胞后,傾去PBS緩沖液,用實(shí)驗(yàn)用免疫組化筆直接畫于培養(yǎng)皿\培養(yǎng)玻片的細(xì)胞培養(yǎng)面。在使用實(shí)驗(yàn)用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應(yīng)在室溫下干燥1-2分鐘后再進(jìn)行下一步操作流程。一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿染色結(jié)束后不宜用二甲苯透明(可重復(fù)使用的玻璃材質(zhì)的培養(yǎng)皿或玻璃材質(zhì)的培養(yǎng)玻片可以),可用甘油類或水溶性封片劑直接滴加于染色的細(xì)胞上,再行封片。
組化筆適用范圍,實(shí)驗(yàn)用免疫組化筆(畫圈筆)有疏水隔離作用,適用于免疫組學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中在組織周圍畫圈,通過在組織片周圍畫圈可以避免浪費(fèi)試劑。防止滴加在玻片或平皿上抗體、探針等液體擴(kuò)散,減少損失,將玻片或平皿分隔成多個(gè)區(qū)域,便于免疫染色,原位雜交,以及其它組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、 細(xì)胞培養(yǎng)、病毒學(xué)及微生物學(xué)研究,使多張切片或多種抗體/探針能在同一玻片或培養(yǎng)皿里染色、比較,圈內(nèi)切片或細(xì)胞可用醛類、乙醇或丙酮固定。