293細(xì)胞是人腎上皮細(xì)胞系，包含多種衍生細(xì)胞株如AAV293、HEK293、293T、 293F、293A等。由于293細(xì)胞以下特點：①.293細(xì)胞比較容易轉(zhuǎn)染；②擁有人類所有的翻譯后修飾，能夠產(chǎn)生與人類自然合成的蛋白質(zhì)最相似的蛋白質(zhì)；③.293細(xì)胞是用于制藥生產(chǎn)的大規(guī)模培養(yǎng)的理想宿主細(xì)胞；④.具有高生長速率、搖瓶中細(xì)胞密度高、高效靈活的代謝和遺傳操作等優(yōu)點，是生物治療藥物生產(chǎn)的可行工具；⑤是一種敏感的人類胚胎細(xì)胞，具有與早期分化神經(jīng)元相似的特征，在體外更容易受到環(huán)境因素的影響，通常被用作新藥發(fā)現(xiàn)和毒性測試的模型，293細(xì)胞被廣泛用于重組治療蛋白、疫苗、抗癌劑和其他臨床相關(guān)藥物的生產(chǎn)研究，因此獲得“工具細(xì)胞"、“21世紀(jì)最有前途的細(xì)胞"等稱號。

圖1 293細(xì)胞形態(tài)

表1 293細(xì)胞基本信息

愛必信最新推出的RF 293細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染試劑可專用于293細(xì)胞的質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染陽性率可高達(dá)95%以上。特別地，RF 293細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染試劑盒擁有極低的細(xì)胞毒性，轉(zhuǎn)染細(xì)胞24小時后，細(xì)胞死亡率僅為5%左右。同時該試劑盒操作十分簡便，先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合，再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細(xì)胞中即可，血清不影響其轉(zhuǎn)染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染性能： 可高效轉(zhuǎn)染293細(xì)胞，包括AAV293 、HEK293、293T、293F、293A，轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)95%。

極低的細(xì)胞毒性：使用可降解生物材料，細(xì)胞毒性低，轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率在5%左右，大大降低了因細(xì)胞毒性對實驗結(jié)果的影響，實驗結(jié)果更為客觀。

操作簡便：可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)液。

圖2 RF 293細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染pEGFP-C2質(zhì)粒到AAV-293細(xì)胞，綠色熒光蛋白的表達(dá)情況

1、轉(zhuǎn)染前的細(xì)胞匯合度以60-70%為宜，轉(zhuǎn)染時細(xì)胞生長狀態(tài)應(yīng)保持良好，不要有支原體污染。

2、轉(zhuǎn)染，建議進(jìn)行優(yōu)化實驗，如24孔培養(yǎng)板，每孔質(zhì)粒用量0.8 ug，轉(zhuǎn)染試劑用量可選擇2.0 ul、2.5 ul、3.0 ul進(jìn)行優(yōu)化。

3、應(yīng)避免轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備體系中存在血清，因血清會干擾RF 293質(zhì)粒與DNA形成復(fù)合物，培養(yǎng)基中盡量不要使用抗生素。

4、對于24孔板，轉(zhuǎn)染前一天接種的細(xì)胞量以1.5-2.5X105個/孔為宜，建議研究者進(jìn)行適當(dāng)?shù)膬?yōu)化。

Absin特色產(chǎn)品線：

WB相關(guān)：ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠；IHC相關(guān)：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體；定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...