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植物血凝素的生物學(xué)功能與應(yīng)用指南

更新時(shí)間:2024-08-19      點(diǎn)擊次數(shù):397

產(chǎn)品介紹:

 

植物血凝素(Phytohemagglutinin, PHA)是指從紅蕓豆(Phaseolus Vulgaris)中提取的一種菜豆類(lèi)凝集素。它是由4個(gè)亞基通過(guò)非共價(jià)鍵結(jié)合形成的四聚體糖蛋白,包含兩種亞基分子,L亞基(白細(xì)胞凝集素)和E(紅細(xì)胞凝集素),含有5種異構(gòu)體(L4,L3E1,L2E2,L1E3 和E4)。L亞基具有白細(xì)胞凝集和高促有絲分裂活性;E亞基具有高紅細(xì)胞凝集和低促有絲分裂活性。

 

根據(jù)不同的亞基組成,PHA可以分為幾種不同的形式,主要包括PHA-L、PHA-E、PHA-P和PHA-M。以下是它們的在科學(xué)研究中的主要用途:

 

PHA-L:

 

主要功能:PHA-L是純化的L4四聚體,主要作為T(mén)淋巴細(xì)胞的刺激原,廣泛用于免疫學(xué)研究。它可用作INF-γICS、ELISPOT實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照;PBMC培養(yǎng)的刺激物;順行神經(jīng)示蹤劑等。

生物學(xué)活性:具有高促有絲分裂活性和白細(xì)胞凝集活性,但紅細(xì)胞凝集活性極低。

應(yīng)用:主要用于刺激T細(xì)胞增殖和免疫反應(yīng)研究。

 

PHA-E:

 

主要功能:PHA-E是純化的E4四聚體,主要用途是紅細(xì)胞凝集或者糖基化修飾的研究。

生物學(xué)活性:具有高紅細(xì)胞凝集活性和低促有絲分裂活性。

應(yīng)用:主要用于紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)和糖基化研究。

 

PHA-P:

 

主要功能:PHA-P是在分離和純化PHA-L和PHA-E前的PHA的蛋白質(zhì)形式,成分與PHA-M相當(dāng)。

生物學(xué)活性:具有促進(jìn)有絲分裂和誘導(dǎo)干擾素分泌的活性。

應(yīng)用:主要用于刺激外周單個(gè)核細(xì)胞增殖,促進(jìn)某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生和膜表面蛋白的表達(dá)。

 

PHA-M:

 

主要功能:PHA-M是植物血凝素的粘性蛋白形式,成分與PHA-P相當(dāng)。主要用于刺激外周單個(gè)核細(xì)胞增殖,促進(jìn)某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生和膜表面蛋白的表達(dá)。

生物學(xué)活性:具有促進(jìn)有絲分裂和誘導(dǎo)干擾素分泌的活性。

應(yīng)用:廣泛用于免疫學(xué)研究,特別是在細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生方面。

 

客戶(hù)應(yīng)用實(shí)例:

 

應(yīng)用一、使用PHA-L(abs47014909)預(yù)刺激Jurkat T細(xì)胞,探究小分子PROTAC介導(dǎo)靶向蛋白降解治療STAT3依賴(lài)性上皮癌癥的機(jī)制[1]

 

將HCT116細(xì)胞以1×104個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種到12孔板中進(jìn)行附著,隨后用TSM-1(1μM)處理24h。然后,使用PHA(10μg/mL)和PMA(10ng/mL)預(yù)刺激Jurkat T細(xì)胞(6×104)4h。HCT116細(xì)胞與活化的Jurkat T細(xì)胞共培養(yǎng)24h。ELISA試劑盒用于檢測(cè)上清液培養(yǎng)基中IL-2的水平,IL-2是監(jiān)測(cè)T細(xì)胞活化的生物標(biāo)志物。用結(jié)晶紫染色法對(duì)潛在的癌癥活細(xì)胞進(jìn)行虛擬化。將細(xì)胞溶解在10%乙酸中后,使用Cytation 5酶標(biāo)儀(BioTek)在595nm下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行定量。

 

圖1  TSM-1在體外誘導(dǎo)T細(xì)胞活化和浸潤(rùn)

 

應(yīng)用二:使用PHA-M(abs47014911)培養(yǎng)Jurkat T細(xì)胞,探究氟化物干擾免疫系統(tǒng)的機(jī)制[2]

 

Jurkat T細(xì)胞(HTX4056,Otwo Biotech)在RPMI 1640培養(yǎng)基中生長(zhǎng),培養(yǎng)基補(bǔ)充了10%胎牛血清(FBS,abs972,Absin)、青霉素-鏈霉素溶液和5ug/mL植物血凝素-M(abs47014911,Absin),5ug/mL Ultra LEAFTM純化的抗人CD28。細(xì)胞系在37°C, 5%CO2和95%空氣的加濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

 

圖2 氟化物可以抑制T細(xì)胞活化,阻礙T細(xì)胞受體的內(nèi)化

 

PHA的不同形式主要區(qū)別在于它們的亞基組成和相應(yīng)的生物學(xué)功能。PHA-L和PHA-E分別具有高促有絲分裂活性和高紅細(xì)胞凝集活性,而PHA-M和PHA-P則主要用于刺激細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生。每種形式在免疫學(xué)研究和細(xì)胞生物學(xué)研究中都有其特定的應(yīng)用。

 


參考文獻(xiàn)


[1] Jin J, Wu Y, Zhao Z, et al. Small-molecule PROTAC mediates targeted protein degradation to treat STAT3-dependent epithelial cancer[J]. JCI Insight. 2022;7(22):e160606.

[2] Zhu S, Liu B, Fu G, et al. PKC-θ is an important driver of fluoride-induced immune imbalance of regulatory T cells/effector T cells[J]. Sci Total Environ. 2024;934:173081.

 

PHA產(chǎn)品推薦:


貨號(hào)

品名

規(guī)格

abs47014910

植物血凝素-L 溶液(500×)

100uL

abs47014909

植物血凝素-L(菜豆)

5mg

abs47014911

植物血凝素-M(菜豆)

5mg

abs47014912

植物血凝素-E(菜豆)

5mg

abs47014913

植物血凝素-P(菜豆)

5mg




 

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abs972

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500mL

abs9484

RPMI 1640培養(yǎng)基(含L-谷氨酰胺,不含HEPES)

500mL×10

abs9244

青霉素-鏈霉素溶液(100×,雙抗)

100mL







 

Absin產(chǎn)品線(xiàn):

爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測(cè)、殘留檢測(cè)、多因子檢測(cè));細(xì)胞培養(yǎng)(類(lèi)器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...

特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...

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