支原體清除劑的使用須知
更新時間:2023-07-28 點擊次數(shù):1756
支原體清除劑是一種大小僅為 0.2~0.3 μm,無細胞壁,可透過一般過濾膜(0.22~0.45 μm)的原核生物,在細胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達到 63%,因而細胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。多篇文獻研究表明:當細胞(特別是傳代細胞)被支原體污染后,細胞內的 DNA、RNA 及蛋白表達發(fā)生改變,而細胞的生長率一般并未發(fā)生顯著的影響,因而細胞被支原體污染一般難以察覺。本品用于解決因支原體污染而導致細胞污染或狀態(tài)下降的問題,同時其對于常見的革蘭氏陰性和陽性菌也有一定的清除作用。從而確保研究人員的研究結果真實、可信。
支原體清除劑的使用說明:
1、建議現(xiàn)配現(xiàn)用,并保持細胞密度在 50~一60%。
2、推薦稀釋比例為1:1000。例如 10 mL的培養(yǎng)基加入10 uL支原體清除劑混勻。
3、棄去舊的培養(yǎng)基,用 PBS將細胞清洗干凈,再加入含有支原體清除劑的新鮮培養(yǎng)基,1天1次,連續(xù)處理3天;或者2天1次,連續(xù)處理5~6天。若細胞污染非常嚴重時,需延長處理時間。
4、若細胞對支原體清除劑敏感,或生長明顯被抑制時,可調整稀釋比例,如:1:2000或1:3000。
5、處理完畢后,加入新鮮培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中可添加支原體預防劑預防支原體再次污染。
6、因支原體清除劑本身具有廣譜抑菌性,為了降低對細胞的影響,強烈建議不要和其它抗生素同時使用。