霍亂毒素 霍亂毒素由(Cholera toxin,CT)天然六聚體蛋白的分子量約為85 kDa,由兩個亞單位組成,即單個A亞單位(CTA)和五個B亞單位(CTB)。A亞單位(~27.2 kDa)是霍亂毒素的活性部分,B亞單位排列為五聚環(huán),具有明顯的5倍對稱性,與細胞表面受體結合和酶組分的后續(xù)內化(跨膜轉運)有關。 霍亂毒素由霍亂操縱子(ctx)編碼,從5到3方向,依次是反激活因子ToxR的識別序列、啟動子、A基因(ctxA)、B基因(ctxB)和不依賴于r因子的轉錄終止系列。現在普遍認為操縱子中只有一個啟動子,ctxA和ctxB位于同一個轉錄單位中。在霍亂弧菌中,ctxB基因的表達水平是ctxA 基因的5倍,克隆的ctx操縱子在大腸桿菌中表達時,B基因的表達水平是A基因的6倍以上。 霍亂毒素B亞單位 霍亂毒素B亞單位基因(CtxB)序列長約380bp,一共編碼124個氨基酸,其中前21個氨基酸為信號肽序列。對CtxB基因編碼的124個氨基酸序列進行計算機軟件二級結構分析,前17個氨基酸具有明顯疏水性,形成一個a螺旋和一個b折疊。第21位的Gly和Thr親水性較強,露于分子表面,有利于信號肽酶的切割。
應用 霍亂毒素及其純化的A亞單位經常用于研究信號轉導機制。此外,霍亂毒素通過刺激B淋巴細胞發(fā)揮輔助作用?;魜y毒素B亞單位單獨用于神經研究中的追蹤,利用GM1神經節(jié)苷脂結合和逆行運輸。經霍亂毒素處理的組織培養(yǎng)細胞不會被殺死,動物組織也不會壞死。
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